Медиатека

Введение

Начиная с первых исследований вируса табачной мозаики, метод ультрацентрифугирования является одним из ключевых при пробоподготовке вирусов для различных научных задач. К “классическим“ применениям метода можно отнести очистку и разделение вирусных частиц в градиентах плотности, а также их характеризацию с помощью метода аналитического центрифугирования. Из более современных направлений выделяют применения, относящиеся к получению и характеризации вирусных векторов для генной терапии.

Такая простая методика, как концентрирование вирусов из водных растворов, в настоящее время, как правило, используется при пробоподготовке образцов для количественного определения содержания в них различных вирусов. При этом диапазон источников образцов и специфических задач достаточно широк: определение содержания вирусного материала в культуральной среде, пробоподготовка для электронной микроскопии, определение вирусов в морских организмах, образцах воды и т.д. Детекция и изучение распространения вирусов в различных водных объектах (питьевая вода, плавательные бассейны, сточные воды, смывы с поерхностей и др.) используются в санитарно-эпидемиологическом контроле. Полученные данные о содержании вирусов можно использовать для прогнозирования и предотвращения распространения вирусных инфекций.

Ультрацентрифугирование - простой, надежный метод для концентрирования вирусов из водных растворов. Процедура, как правило, включает один цикл центрифугирования, в результате которого целевой вирус осаждается на дне центрифужной пробирки.

Протокол “концентирование вирусов из водных растворов»

Одновременное центрифугирование 6 – 12 образцов примерно в течение одного часа*, объем пробирки/ образца составляет 10 – 94 мл.
Возможны другие варианты с большим количеством образцов и их объемов.

Вирусные частицы гомогенно распределены в воде

Центрифугирование при ускорении 200, 000 x g в течение одного часа

Вирусные частицы осаждаются на дне пробирке, супернатант потенциально содержит более мелкие включения

Удаление супернатанта

Осадок, содержащий вирусы, может быть использован для дальнейших манипуляций и анализа (лизис, экстракция НК, количественная ПЦР и т.д.)

*оптимальное время центрифугирования зависит от типов вирусов и их специфических коэффициентов седиментации

Преимущества метода ультрацентрифугирования

Предсказуемость и воспроизводимость
Метод ультрацентрифугирования не требует стандартных образцов, осаждение частиц можно описать законами гидродинамики. Это означает, что каждый этап центрифугирования может быть заранее расчитан и воспроизведен.
Малый объем образца и простота процедуры Необходимо лишь несколько простых манипуляций для получения желаемого результата: поместить гомогенизированный образец в пробирку, установить ротор с пробирками и запустить программу центрифугирования, после завершения прогона – извлечь пробирки, декантировать супернатант, повторно растворить осадок.
Возможность контролировать концентрацию вируса после повторного растворения Осадок вирусных частиц может быть определен количественно (например, взвешиванием пробирок), а объем жидкости, необходимый для повторного растворения, легко подсчитан.
Масштабируемость Процедура может быть легко масштабирована путем как увеличения количества пробирок, так и увеличения их объема.
Биобезопасность В ультрацентрифугах серии Optima X биобезопасность обеспечивается на нескольких уровнях за счет: герметичности пробирок, специальной конструкции роторов, а также возможности встраивания стерильных фильтров.
Практичные расходные материалы Широкий выбор пробирок различных объемов и конструкций поможет подобрать оптимальный протокол центрифугирования в зависимости от типа образца. А общие затраты на расходные материалы по сравнению с альтернативными методами окажутся невысокими.

• Интуитивно понятный интерфейс

• Возможность установки стерилизующих фильтров

• Пробирки с коническим дном konical для концентрирования осадка небольшого объема

Рекомендуемые центрифуги, роторы, пробирки**

Препаративные ультрацентрифуги Optima XPN Центрифуги Optima XPN - премиальная линейка ультрацентрифуг. От базовой линейки (Optima XE) их отличает наличие расширенных возможностей интерфейса управления. Доступны модели с максимальными скоростями 80, 000 об/мин, 90, 000 об/мин и 100, 000 об/мин, а также с предустановленными стерилизующими фильтрами (комплектация BioSafe).
Угловые роторы
В угловых роторах осадок концентрируется несимметрично. Доступны как одноразовые, так и многоразовые пробирки**.

Типы пробирок		Type 50.2 Ti 12 пробирок x 39 мл	Type 45 Ti 6 пробирок x 94 мл
1. Флаконы с крышками Просты и удобны в работе благодаря завинчивающейся крышке, для многократного использования Допустимо заполнение наполовину		50,000 об/мин 302,000 x g 12 шт. x 26.3 мл	45,000 об/мин 235,000 x g 6 шт. x 70 мл
2. Пробирки OptiSeal Герметично укупориваются с помощью спейсера		50,000 об/мин 302,000 x g 12 шт. x 32.4 мл	–
3. Пробирки QuickSeal Герметично запаиваются Оптимальны при работе с патогенными вирусами		50,000 об/мин 302,000 x g 12 шт. x 15-39 мл	45,000 об/мин 235,000 x g 6 шт. x 94 мл
4. Толстостенные пробирки Многократного использования, допустимо заполнение наполовину		40,000-50,000 об/мин 179,000-302,000 x g 12 шт. x 4-30 мл	15,000 - 45,000 об/мин 26,200-235,000 x g 6 шт. x 4-81 мл

Бакетные роторы
В бакетных роторах осадок концентрируется симметрично на дне пробирки. Для концентрирования осадков небольшого объема рекомендуется использовать пробирки с коническим дном konical**.

Типы пробирок		SW 41 Ti 6 пробирок × 13.2 мл	SW 32 Ti 6 пробирок × 38.5 мл
1. Пробирки UltraClear (тонкостенные) Прозрачные, осадок легко различим невооруженным взглядом		41,000 об/мин 288,000 x g 6 шт. x 13.2 мл	32,000 об/мин 175,000 x g 6 шт. x 38.5 мл
2. Полипропиленовые (тонкостенные) С круглым или коническом дном Для концентрирования осадков небольшого объема рекомендуется использовать пробирки с коническим дном		41,000 об/мин 284,000 / 288,000 x g 6 шт. x 10 / 13.2 мл	32,000 об/мин 175,000 x g 6 шт. x 31.5 / 38.5 мл
3. Толстостенные пробирки Многократного использования, допустимо заполнение наполовину		–	32,000 об/мин 175,000 x g 6 шт. x 31 мл
4. Пробирки OptiSeal Герметично укупориваются с помощью спейсера		–	32,000 об/мин 175,000 x g 6 шт. x 32.4 мл
5. Пробирки QuickSeal С круглым или коническом дном Герметично запаиваются Оптимальны при работе с патогенными вирусами		41,000 об/мин 284,000 / 288,000 x g	32,000 об/мин 175,000 x g 6 шт. x8.4-33,5 мл

**полный перечень роторов, пробирок, а также необходимых в работе дополнительных аксессуаров представлен в каталоге “Ультрацентрифуги“

Техническая спецификация

***комплектация BioSafe включает центрифугу, фармацевтические стерилизующие фильтры и необходимые компоненты для установки

По вопросам оформления заказа и получения дополнительной информации по данной продукции вы можете обращаться к нашим специалистам:
E-mail: mail@helicon.ru, тел. 8 800 770 71 21 (звонок бесплатный) или *7550 (бесплатные звонки с мобильных телефонов МТС, Мегафон, Теле2, Билайн).

#XPN-100 #XPN-90 #XPN-80 #XE-100 #XE-90