КОРЗИНА:

товаров 0
сумма 0 руб.


Бесплатная
горячая линия:
8 (800) 770-71-21

Контакты


Школа по репродуктивной генетике
г. Москва,

23–25.08.2017 г.
Подробнее>>

Проточная цитометрия
г. Челябинск
21–28.08.2017 г.
Подробнее>>

Future of Biomedicine 2017
г. Владивосток, остров Русский

10–15.09.2017 г.
Подробнее>>

Запиcь на курсы
в СПбГУ
сентябрь-октябрь 2017 г.
Подробнее>>


Капиллярный электрофорез


STR-профиль человека получают с использованием фрагментного анализа. Фрагментный анализ основан на разделении флуоресцентно меченных фрагментов ДНК методом капиллярного электрофореза и определении размеров фрагментов методом сравнения с размерным стандартом.
В настоящее время для фрагментного анализа в криминалистике и судебной медицине валидирован прибор компании Applied Biosystems® 3500.
Непосредственно перед фрагментным анализом необходимо откалибровать генетический анализатор по тем флуоресцентным красителям, которыми мечены разделяемые фрагменты.


В ходе эксперимента по идентификации личности в процессе амплификации к STR-локусам присоединяются флуоресцентно меченные праймеры. Красители, используемые в качестве меток – 6-FAM, VIC®:, NED, TAZ, PET®:, SID, LIZ®. Для калибровки генетического анализатора при работе с наборами MiniFiler, Identifiler® Plus, NGM SElect и Yfiler® Plus подходит матричный стандарт DS-33. Он калибрует прибор по пяти красителям. Четырьмя из них мечены праймеры, пятым – размерный стандарт (аллельный леддер). В наборе GlobalFiler® используется 6-красочная технология мечения праймеров (5 красителями мечены праймеры, краситель LIZ® используется для мечения аллельного леддера GeneScan 600 LIZ®), для него необходим свой матричный стандарт – DS-36.

Аллельный леддер разгоняется одновременно с образцами. Через капилляр проходит смесь флуоресцентно меченных фрагментов размерного стандарта и исследуемых образцов. Фрагменты аллельного леддера различаются на несколько нуклеотидов (их длины соответствуют возможным длинам STR-локусов). При анализе результатов прогона исследуемых образцов, определяется, какой длине, то есть какому числу повторов STR, соответствует фрагмент.

На рис.1 представлена гипотетическая картинка, на которой отображены все варианты фрагментов, которые возможно получить с помощью набора GlobalFiler®.

Рис.1. Варианты фрагментов, которые можно получить с помощью набора GlobalFiler®. В каждой строке представлено аллельное разнообразие по отдельным STR-локусам (указаны зелёным над пиками). Один пик соответствует определённому количеству повторов STR, то есть определённой длине фрагмента. Локусы, расположенные в одном ряду, мечены одним красителем.

Специальное программное обеспечение GeneMapper® ID-X Software v1.4, разработанное для задач идентификации личности, позволяет преобразовать сырые данные фрагментного анализа в наглядные данные об STR-профиле человека.

Картина, получаемая для одного образца представлена на рис.2.

Рис.2. Результат анализа одного образца с помощью набора Identifiler®.

Подробнее с технологией капиллярного электрофореза можно ознакомиться в статье «Капиллярный электрофорез. Теория».

Наглядное видео о технологии и применении фрагментного анализа можно посмотреть здесь.