Полимеразная цепная реакция (ПЦР)

Полимеразная цепная реакция (ПЦР) – экспериментальный метод молекулярной биологии, позволяющий добиться значительного увеличения малых количеств определённых фрагментов ДНК в пробе. Помимо амплификации ДНК, ПЦР позволяет проводить множество других манипуляций с нуклеиновыми кислотами (введение мутаций, соединение фрагментов ДНК) и широко используется в биологической и медицинской практике. Метод ПЦР основан на многократном избирательном копировании in vitro определенного участка ДНК с помощью термофильных ферментов – ДНК-полимераз, катализирующих реакцию полимеризации ДНК и сохраняющих активность при высокой температуре длительное время. Компания Thermo Fisher Scientific производит рекомбинантные ферменты для различных видов ПЦР, созданные на основе Taq полимеразы из Thermus aquaticus и Pfu-полимеразы из Pyrococcus furiosus, а также наборы для проведения ПЦР.

Подробнее>>

Полимеразная цепная реакция с обратной транскрипцией (ОТ-ПЦР, англ. RT-PCR) представляет собой метод амплификации специфического фрагмента РНК. На первом этапе на матрице мРНК с помощью фермента обратной транскриптазы (ревертазы) синтезируют комплементарную ДНК (кДНК), которая затем используется в качестве матрицы для ПЦР. Компания Thermo Fisher Scientific под брендом Fermentas производит широкий спектр обратных транскриптаз с разными свойствами, а также наборы для обратной транскрипции.

ПЦР в реальном времени (или количественная ПЦР, англ. Real-time PCR, qPCR) - метод, основанный на полимеразной цепной реакции, используется для одновременной амплификации и измерения количества синтезируемых молекул ДНК после каждого цикла амплификации. Для количественного определения ДНК в смесях для проведения ПЦР используются флуоресцентные красители, интеркалирующие в двуцепочечные молекулы нуклеиновой кислоты, и модифицированные дезоксирибонуклеотиды, которые флуоресцируют после гибридизации с комплементарными участками ДНК. Часто ПЦР в реальном времени комбинируют с ОТ-ПЦР для измерения малых количеств мРНК, что позволяет судить об уровне экспрессии определенного гена в клетке.

Буферы для ПЦР обеспечивают оптимальные условия для функционирования Taq ДНК-полимераз и достижения максимального выхода продуктов ПЦР. Ионы калия в составе буфера способствуют эффективной гибридизации праймеров, в то время как ионы аммония препятствуют образованию некомплементарных комплексов. Наличие в буфере как KCl, так и (NH4)2SO4 существенно повышает специфичность гибридизации. Ионы магния (в концентрации 1–4 мМ) способствуют стабилизации комплекса между праймерами и матрицей и увеличению выхода целевого продукта ПЦР.

Все буферы должны храниться при -20°C. Буферы, в состав которых входит бычий сывороточный альбумин (БСА), выдерживают многократное размораживание-замораживание без выпадения БСА в осадок.

Акция
картинка Смесь для проведения ПЦР Phire Plant Direct Master Mix (2X) от магазина Helicon
Смесь для проведения ПЦР Phire Plant Direct Master Mix (2X)

100 реакций

F160S

$120.05 7 751.11 р. 7 751.11 р.

500 реакций

F160L

$484.58 31 287.25 р. 31 287.25 р.

Акция
картинка Смесь для проведения ПЦР Phire Tissue Direct Master Mix (2X) от магазина Helicon
Смесь для проведения ПЦР Phire Tissue Direct Master Mix (2X)

100 реакций

F170S

$146.90 9 484.70 р. 9 484.70 р.

500 реакций

F170L

$657.75 42 468.09 р. 42 468.09 р.

Акция
картинка Смесь для проведения ПЦР Phusion Blood Direct Master Mix (2X) от магазина Helicon
Смесь для проведения ПЦР Phusion Blood Direct Master Mix (2X)

100 реакций

F175S

$88.04 5 684.36 р. 5 684.36 р.

500 реакций

F175L

$384.17 24 804.20 р. 24 804.20 р.

картинка Смесь для проведения ПЦР с ДНК-полимеразой Maxima™ Hot Start Green Master Mix (2X) от магазина Helicon

100 реакций

K1069

Цена по запросу

100 реакций

K1061

$115.45 7 454.11 р. 7 454.11 р.

500 реакций

K1062

$449.86 29 045.53 р. 29 045.53 р.

картинка Универсальный супермикс iTaq Universal SYBR® Green от магазина Helicon

200 реакций

1725120

5 821 р. 5 821 р. 5 821 р.

500 реакций

1725121

14 104 р. 14 104 р. 14 104 р.

1 000 реакций

1725122

26 501 р. 26 501 р. 26 501 р.

картинка Мастер-микс SsoAdvanced™ Universal SYBR® Green Supermix от магазина Helicon

200 x 20 мкл

1725270

8 471 р. 8 471 р. 8 471 р.

500 x 20 мкл

1725271

17 353 р. 17 353 р. 17 353 р.

1000 x 20 мкл

1725272

35 346 р. 35 346 р. 35 346 р.

картинка Мастер-микс SsoAdvanced™ Universal SYBR® Green Supermix от магазина Helicon

200 x 20 мкл

1725280

6 150 р. 6 150 р. 6 150 р.

500 x 20 мкл

1725281

17 170 р. 17 170 р. 17 170 р.

1000 x 20 мкл

1725282

46 884 р. 46 884 р. 46 884 р.

картинка Наборы TaqMan® для генотипирования  SNP от магазина Helicon
Наборы TaqMan® для генотипирования SNP

2 400 реакций

4351374

Цена по запросу

1 000 реакций

4351376

Цена по запросу

300 реакций

4351379

Цена по запросу

картинка Обратная транскриптаза RevertAid™ H Minus от магазина Helicon
Обратная транскриптаза RevertAid™ H Minus

10000 е.а.

EP0451

$176.10 11 370.02 р. 11 370.02 р.

5 х 10000 е.а.

EP0452

$700.90 45 254.10 р. 45 254.10 р.

2000 e.a.

EP0457

Цена по запросу

картинка Обратная транскриптаза RevertAid™ от магазина Helicon
Обратная транскриптаза RevertAid™

10000 е.а.

EP0441

$81.98 5 293.10 р. 5 293.10 р.

5 х 10000 е.а.

EP0442

$314.32 20 294.29 р. 20 294.29 р.

2000 e.a.

EP0447

Цена по запросу

DreamTaq™ Green Master Mix (2X)

200 реакций

K1081

$108.48 7 004.09 р. 7 004.09 р.

1000 реакций

K1082

$418.89 27 045.93 р. 27 045.93 р.

Смесь для проведения ПЦР Phusion Blood Direct Kit

100 реакций

F547S

$90.91 5 869.67 р. 5 869.67 р.

500 реакций

F547L

$404.20 26 097.46 р. 26 097.46 р.

картинка Краситель для ПЦР в реальном времени Precision Blue™ от магазина Helicon

10 мл

1725555

1 770 р. 1 770 р. 1 770 р.

картинка Мастер-микс SsoAdvanced PreAmp для преамплификации от магазина Helicon

2,5 мл

1725160

27 375 р. 27 375 р. 27 375 р.

картинка Краситель для ПЦР в реальном времени ROX от магазина Helicon

0,5 мл

1725858

2 960 р. 2 960 р. 2 960 р.