Полимеразная цепная реакция (ПЦР)

Полимеразная цепная реакция (ПЦР) – экспериментальный метод молекулярной биологии, позволяющий добиться значительного увеличения малых количеств определённых фрагментов ДНК в пробе. Помимо амплификации ДНК, ПЦР позволяет проводить множество других манипуляций с нуклеиновыми кислотами (введение мутаций, соединение фрагментов ДНК) и широко используется в биологической и медицинской практике. Метод ПЦР основан на многократном избирательном копировании in vitro определенного участка ДНК с помощью термофильных ферментов – ДНК-полимераз, катализирующих реакцию полимеризации ДНК и сохраняющих активность при высокой температуре длительное время. Компания Thermo Fisher Scientific производит рекомбинантные ферменты для различных видов ПЦР, созданные на основе Taq полимеразы из Thermus aquaticus и Pfu-полимеразы из Pyrococcus furiosus, а также наборы для проведения ПЦР.

Подробнее>>

Полимеразная цепная реакция с обратной транскрипцией (ОТ-ПЦР, англ. RT-PCR) представляет собой метод амплификации специфического фрагмента РНК. На первом этапе на матрице мРНК с помощью фермента обратной транскриптазы (ревертазы) синтезируют комплементарную ДНК (кДНК), которая затем используется в качестве матрицы для ПЦР. Компания Thermo Fisher Scientific под брендом Fermentas производит широкий спектр обратных транскриптаз с разными свойствами, а также наборы для обратной транскрипции.

ПЦР в реальном времени (или количественная ПЦР, англ. Real-time PCR, qPCR) - метод, основанный на полимеразной цепной реакции, используется для одновременной амплификации и измерения количества синтезируемых молекул ДНК после каждого цикла амплификации. Для количественного определения ДНК в смесях для проведения ПЦР используются флуоресцентные красители, интеркалирующие в двуцепочечные молекулы нуклеиновой кислоты, и модифицированные дезоксирибонуклеотиды, которые флуоресцируют после гибридизации с комплементарными участками ДНК. Часто ПЦР в реальном времени комбинируют с ОТ-ПЦР для измерения малых количеств мРНК, что позволяет судить об уровне экспрессии определенного гена в клетке.

Буферы для ПЦР обеспечивают оптимальные условия для функционирования Taq ДНК-полимераз и достижения максимального выхода продуктов ПЦР. Ионы калия в составе буфера способствуют эффективной гибридизации праймеров, в то время как ионы аммония препятствуют образованию некомплементарных комплексов. Наличие в буфере как KCl, так и (NH4)2SO4 существенно повышает специфичность гибридизации. Ионы магния (в концентрации 1–4 мМ) способствуют стабилизации комплекса между праймерами и матрицей и увеличению выхода целевого продукта ПЦР.

Все буферы должны храниться при -20°C. Буферы, в состав которых входит бычий сывороточный альбумин (БСА), выдерживают многократное размораживание-замораживание без выпадения БСА в осадок.

Акция
картинка Мастер-микс DreamTaq™ Hot Start PCR Master Mix от магазина Helicon
Мастер-микс DreamTaq™ Hot Start PCR Master Mix

20 реакций

K9019

Цена по запросу

200 реакций

K9011

$153.28 8 897.31 р. 8 897.31 р.

1 000 реакций

K9012

$682.98 39 644.33 р. 39 644.33 р.

Акция
картинка Мастер-микс DreamTaq™ Hot Start Green PCR Master Mix от магазина Helicon
Мастер-микс DreamTaq™ Hot Start Green PCR Master Mix

20 реакций

K9029

Цена по запросу

200 реакций

K9021

$153.28 8 897.31 р. 8 897.31 р.

1 000 реакций

K9022

$682.98 39 644.33 р. 39 644.33 р.

картинка Смесь для проведения ПЦР с ДНК-полимеразой Maxima™ Hot Start Green Master Mix (2X) от магазина Helicon

100 реакций

K1069

Цена по запросу

100 реакций

K1061

$115.45 6 701.42 р. 6 701.42 р.

500 реакций

K1062

$449.86 26 112.62 р. 26 112.62 р.

картинка Универсальный супермикс iTaq Universal SYBR® Green от магазина Helicon

200 реакций

1725120

5 821 р. 5 821 р. 5 821 р.

500 реакций

1725121

14 104 р. 14 104 р. 14 104 р.

1 000 реакций

1725122

26 501 р. 26 501 р. 26 501 р.

картинка Универсальный супермикс SsoAdvanced от магазина Helicon
Универсальный супермикс SsoAdvanced

200 реакций

1725280

6 153 р. 6 153 р. 6 153 р.

200 реакций

1725270

8 471 р. 8 471 р. 8 471 р.

500 реакций

1725281

17 171 р. 17 171 р. 17 171 р.

картинка Наборы TaqMan® для генотипирования  SNP от магазина Helicon
Наборы TaqMan® для генотипирования SNP

2 400 реакций

4351374

Цена по запросу

1 000 реакций

4351376

Цена по запросу

300 реакций

4351379

Цена по запросу

картинка Набор для ПЦР в реальном времени Power SYBR® Green Cells-to-CT™ от магазина Helicon

400 реакций

4402955

Цена по запросу

100 реакций

4402954

Цена по запросу

40 реакций

4402953

Цена по запросу

картинка Обратная транскриптаза RevertAid™ от магазина Helicon
Обратная транскриптаза RevertAid™

10000 е.а.

EP0441

$81.98 4 758.62 р. 4 758.62 р.

5 х 10000 е.а.

EP0442

$314.32 18 245.05 р. 18 245.05 р.

2000 e.a.

EP0447

Цена по запросу

картинка Набор для ПЦР в реальном времени Cells-to-CT™ 1-Step Power SYBR™ Green от магазина Helicon

400 реакций

A25599

Цена по запросу

100 реакций

A25600

Цена по запросу

20 реакций

A25601

Цена по запросу

картинка Обратная транскриптаза RevertAid™ H Minus от магазина Helicon
Обратная транскриптаза RevertAid™ H Minus

10000 е.а.

EP0451

$176.10 10 221.92 р. 10 221.92 р.

5 х 10000 е.а.

EP0452

$700.90 40 684.51 р. 40 684.51 р.

2000 e.a.

EP0457

Цена по запросу

Смесь для проведения ПЦР Phusion Blood Direct Kit

100 реакций

F547S

$90.91 5 276.97 р. 5 276.97 р.

500 реакций

F547L

$404.20 23 462.23 р. 23 462.23 р.

Смесь для проведения ПЦР Phusion Blood Direct Master Mix (2X)

100 реакций

F175S

$113.51 6 588.81 р. 6 588.81 р.

500 реакций

F175L

$512.20 29 731.21 р. 29 731.21 р.

Смесь для проведения ПЦР Phire Tissue Direct Master Mix (2X)

100 реакций

F170S

$190.15 11 037.47 р. 11 037.47 р.

500 реакций

F170L

$849.84 49 329.90 р. 49 329.90 р.

Смесь для проведения ПЦР Phire Plant Direct Master Mix (2X)

100 реакций

F160S

$155.22 9 009.92 р. 9 009.92 р.

500 реакций

F160L

$625.74 36 321.77 р. 36 321.77 р.

DreamTaq™ Green Master Mix (2X)

200 реакций

K1081

$108.48 6 296.84 р. 6 296.84 р.

1000 реакций

K1082

$418.89 24 314.93 р. 24 314.93 р.