Красители органелл

Специфические реагенты Molecular Probes®

Подробнее

Специфические реагенты Molecular Probes® разработаны для флуоресцентного окрашивания всех основных органелл:

Плазмалемма | Ядро | Эндоплазматический ретикулум (ЭПР) | Аппарат Гольджи (АГ) | Аутофагосомы | Везикулы (Лизосомы и Эндосомы) | Пероксисомы | Цитоскелет (Актин и Тубулин) | Митохондрии.

Спектральная совместимость красителей позволяет проводить многоцветную визуализацию с использованием до 4 цветов:

  • Синий;
  • Зеленый;
  • Оранжевый/Красный;
  • Дальний красный.

Каталог Invitrogen включает реагенты для окрашивания как живых, так и фиксированных клеток. Многие красители живых клеток фиксируемы.

Антитела и красители клеточных структур, рекомендуемые для многоцветной визуализации, представлены в виде наглядного Симулятора флуоресцентного окрашивания клетки.

Прижизненное окрашивание органелл

С помощью реагентов Molecular Probes® для прижизненного окрашивания органелл можно наблюдать за процессами, происходящими в живых клетках, в режиме реального времени.

Технология BacMam

Система BacMam использует модифицированный бакуловирус (вирус насекомых) для эффективной трансдукции и экспрессии генов в клетках млекопитающих с минимальной оптимизацией и токсичностью.

Любой реагент системы BacMam – это бакуловирус, несущий ДНК-конструкцию, компонентами которой являются:

  • Промотор млекопитающих. В естественной среде бакуловирусы не инфицируют клетки млекопитающих, поэтому для экспрессии в этих клетках необходим соответствующий промотор. При этом вирус не приобретает способность реплицироваться в клетках млекопитающих, а следовательно, он полностью безопасен.
  • Участок, кодирующий зонд – гибридный белок «Probe content» + FP:
    • «Probe content» – элемент, ответственный за узнавание структуры клетки (например, сигнальный пептид в реагентах CellLight™) или детекцию функций (в реагентах Premo™);
    • FP – флуоресцентный белок, например, GFP.

Эффективность трансдукции зависит от типа клеток.

  • Первые созданные Molecular Probes® реагенты (марки Organelle Lights™ и Cellular Lights™)  использовали технологию BacMam 1.0 и обеспечивали эффективность трансдукции ~50% в первичных клетках и ~10% в клеточных линиях;
  • Появление усилителя (ингибитора деацетилазы гистонов) позволило достичь эффективности >50% в первичных и стволовых клетках и в клеточных линиях;
  • С помощью технологии BacMam 2.0 (марки CellLight™ и Premo) удалось успешно трансдуцировать нейроны (>50%) и стабильные линии T-клеток (~50%).

Протокол работы с реагентами BacMam очень прост:

  • Добавить реагент к клеткам;
  • Инкубировать 6–12 часов;
  • Визуализировать с помощью микроскопа или детектировать на планшетном флуориметре.

Преимущества системы BacMam:

  • Исследование внутриклеточных процессов в реальном времени;
  • Реагенты полностью готовы к использованию;
  • Не требуется субклонирование;
  • Простой протокол;
  • Высокоэффективная трансдукция более чем 90 типов клеток млекопитающих (исключения: B-клетки и первичные T-клетки);
  • Стабильная экспрессия от 5 часов до 4 недель в зависимости от типа клеток и прочих условий;
  • Безопасность: бакуловирусы не реплицируются в клетках млекопитающих;
  • Нет потенциально вредных для клеток веществ (липидов, химически активных красителей), нет интеграции в геном. Клетки полностью сохраняют жизнеспособность, что позволяет использовать реагенты BacMam  многократно;
  • Многоцветная визуализация:
    • Эффективная котрансдукция несколькими реагентами BacMam;
    • Сочетаемость с антителами (возможность фиксации) и красителями MitoTracker® и LysoTracker®;
  • Титруемость: больше концентрация – интенсивнее сигнал;
  • Возможность хранения трансдуцированных клеток в замороженном виде до непосредственного тестирования.

Артикулы наборов CellLight™ и Premo™ (технология BacMam 2.0)


CFP GFP RFP
Плазмалемма C10606 C10608
Ядро C10602 C10603
Ядро: гистон 2B C10594 C10595
ЭПР C10590 C10591
АГ C10592 C10593
Аутофагосомы P36235 P36235
Лизосомы C10596 C10597
Эндосомы C10586 C10587
Пероксисомы C10604
Актин C10582
Тубулин C10613 C10614
MAP4 C10598 C10599
Митохондрии
C10600 C10601

1 мл

C10606

Цена по запросу