/catalog/reagenty/

Обратная транскриптаза RevertAid™ H Minus

Артикул: EP0451

Производитель: Thermo Fisher Scientific

Цена в валюте / в рублях

Фасовка:

$176.10

11 515.80 р.

Концентрация фермента – 200 е.а./мкл.
В упаковку также входит 5 пробирок по 1 мл 5-тикратного буфера для проведения реакции.

Обратная транскриптаза (ОТ) RevertAid™ H Minus представляет собой генетически модифицированную обратную транскриптазу M-MuLV. Она отличается от ОТ M-MuLV дикого типа по структуре, каталитическим свойствам и оптимальной температуре функционирования. ОТ RevertAid™ H Minus является РНК- и ДНК-зависимой ДНК-полимеразой с максимальной активностью при 42-45 °С (активна до 55 °С). Она способна синтезировать первую цепь кДНК длиной до 13000 пар нуклеотидов и встраивать в растущую цепь ДНК модифицированные нуклеотиды (например, нуклеотиды, содержащие красители Cy3, Cy5, остатки родамина, аминоаллила и флуоресцеина).
Фермент имеет точечную аминокислотную замену в домене, выполняющем функцию рибонуклеазы Н по отношению к РНК в гибридах РНК-ДНК. Таким образом, ОТ RevertAid™ H Minus не проявляет свойства рибонуклеазы H, что позволяет получать полноразмерные фрагменты кДНК с протяженных матриц.
ОТ RevertAid™ H Minus выделяют из клеток E. coli, которые содержат клонированный фрагмент гена pol, кодирующий обратную транскриптазу вируса мышиного лейкоза Молони. Фермент лишен примесей эндодезоксирибонуклеаз и рибонуклеаз.

Области применения обратной транскриптазы RevertAid™ H Minus:

  • синтез первой цепи кДНК (до 13000 пар нуклеотидов) для ПЦР с обратной транскрипцией (ОТ-ПЦР) и ОТ-ПЦР в реальном времени;
  • обратная транскрипция при повышенной температуре для уменьшения влияния вторичной структуры матрицы на протекание реакции;
  • синтез кДНК для клонирования и экспрессии;
  • создание меченых проб кДНК для микрочипов;
  • введение метки в ДНК;
  • анализ структуры РНК методом удлинения праймера.

За единицу активности ОТ RevertAid™ H Minus принимают количество фермента, необходимое для включения 1 нмоль dTMP в полинуклеотидную фракцию, иммобилизованную на носителе DE-81, за 10 мин при 37 °С. Исследование ферментативной активности проводят в 50 мМ Трис-HCl буфере (рН 8,3), содержащем 50 мМ KCl, 4 мМ MgCl2, 10 мМ дитиотреит, 0,4 мМ polyA•oligo(dT)12-18, 0,5 мМ dTTP и 0,4 МБк/мл [3H]dTTP.

Буфер для хранения ОТ RevertAid™ H Minus:
50 мМ Трис-HCl (рН 7,5), 100 мМ NaCl, 5 мМ ДТТ, 1 мМ ЭДТА, 0,1% (V/V) тритона Х-100, 50% (V/V) глицерина.

Условия хранения: -20 °С.

5X Буфер для проведения реакции: 250 мМ Трис-HCl (рН 8,3 при 25 °С), 250 мМ KCl, 20 мМ MgCl2, 50 мМ ДТТ.
Ингибиторами ОТ RevertAid™ H Minus являются фосфат-ионы неорганических соединений, пирофосфаты, полиамины и хелатные соединения с ионами металлов.
ОТ RevertAid™ H Minus инактивируется в результате прогревания в течение 10 мин при 70 °С.

Дополнительная информация

Вы можете воспользоваться пробником на 2 000 е.а.

Модификации

Описание

Артикул

Цена

Кол-во

Сумма

Обратная транскриптаза RevertAid™ H Minus

EP0451

$176.10 11 515.80 р. 11 515.80 р. 176.1 11515.79535 11515.79535 RUB

$0

0 р.
Обратная транскриптаза RevertAid™ H Minus

EP0452

$700.90 45 834.30 р. 45 834.30 р. 700.9 45834.30415 45834.30415 RUB

$0

0 р.
Обратная транскриптаза RevertAid™ H Minus

EP0457

Цена по запросу

Итого: $0

0 р. Заказать

Здесь вы можете увидеть расходные материалы для данного оборудования

Здесь вы можете увидеть комплектующие для данного оборудования